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益生菌等作为饲料添加剂在控制细菌性鱼类疾

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  • 时间:2023/4/16 9:56:06
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有越来越多的文献指出,益生菌、免疫刺激剂、植物产品和口服疫苗在免疫调节方面取得了成功,即刺激先天、细胞和/或体液免疫反应,以及控制细菌性鱼类疾病。益生菌被视为口服的活微生物,对健康有益。然而,与陆生动物相比,水产养殖中评估了多种微生物,其作用方式通常反映免疫调节。此外,对活细胞的需求也受到质疑。此外,包括脂多糖在内的关键亚细胞成分也被认为对鱼类有益。这里,免疫刺激剂也可以口服。此外,据报道,许多植物产品对健康有益,即对某些免疫参数被刺激的疾病有保护作用。口服疫苗可以预防某些疾病,尽管其作用方式通常与体液免疫而不是先天免疫和细胞免疫反应有关。这篇综述探讨了益生菌、免疫刺激剂、植物产品和口服疫苗之间的关系。

介绍疾病对全球水产养殖具有重要意义,缓解措施反映了多种预防和治疗方法(表1)。在这些方法中,益生菌引起了相当大的兴趣,因为它们可能是在当地生产的,并且不受吞噬其他疾病控制方法的昂贵许可要求的限制。研究表明,作用模式通常反映免疫调节,因此提出了一个问题,即益生菌与命名免疫刺激剂、植物产品和口服疫苗之间有何差异(如果有的话),后者也会诱导免疫应答(AustinAustin;NewajFyzul、AlHarbiAustin)。这些联系将在近期文献的背景下进一步探讨。

表1

益生菌益生菌,已被粮食及农业组织(FAO)和世界卫生组织(WHO)定义为“活微生物,当给予足够的量时,会给宿主带来健康益处”(FAO/世界卫生组织),已被广泛用于水产养殖的疾病控制,尤其是在发展中国家。一般来说,在人类和陆生动物医学中,益生菌的中心是与酸奶和发酵乳饮料的生产相关的乳酸产生菌,即推定乳酸杆菌。然而,在水产养殖方面,粮农组织/世界卫生组织公认的定义已经扩大,包括广泛的革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌、噬菌体、微藻和酵母菌(表2),通过水传播途径[特别是无脊椎动物培养]以及饲料进行应用。粮农组织/世界卫生组织定义的要点是,益生菌是活生物体,口服给药,对健康有一定的实际益处。在实践中,只有有限的证据表明,一旦益生菌培养物添加到饲料中,益生菌的持续生存能力就会得到验证,并且对其健康益处的描述可能不准确。当然,饲料加工(即造粒和挤压)可能会对生存能力产生影响。例如,根据Nakandakare等人(年),与颗粒饲料相比,挤压饲料中添加益生菌可提高尼罗河罗非鱼的非特异性免疫能力。

从历史的角度来看,在水产养殖中使用益生菌的起源尚不清楚。然而,现在有证据表明,益生菌在鳍鱼和无脊椎动物养殖中的广泛使用,尤其是在南美和亚洲,尤其是中国和印度。益生菌具有一系列有益作用,包括:生长增强,包括尺寸和体重增加以及提高饲料转化率[尽管也有报道称增长减少或对增长产生中性影响,抗病性,肠道微生物减少同时需要更少的化学治疗。出版物中的不足之处很多,通常反映出缺乏证据证明益生菌实际上对宿主无害,在给药期间,微生物在饲料中存活,并且在长期储存或重复继代培养期间,有益作用不会恶化。相比之下,只有少数文章考虑了益生菌有益作用的持续时间,也就是说,益生菌是否仅在应用于宿主期间持续,或者是否有记忆的证据,这与[口服]疫苗有关?人们对使用据报告含有鱼类或贝类病原体的属的生物表示关切,例如气单胞菌和假单胞菌。在这里,存在通过水平基因转移获得毒力基因的可能性,但迄今为止,无论是在宿主体内还是在水生环境中,都没有任何证据证明发生了这种情况。然而,有证据表明,在其他具有人类疾病意义的生物体内,例如大肠杆菌、耐万古霉素肠球菌和耐甲氧西林金黄色葡萄球菌,抗生素耐药基因的获得和致病性毒力遗传的增加。一个首要问题是,科学方法缺乏标准化,导致难以在研究之间进行比较。

培养物的来源益生菌培养物的来源继续反映了早期的工作,其中引用了水、沉积物[包括沙子]、鱼内脏、培养物收集和商业产品。选择的原因通常反映了抗菌活性,如果作用方式是竞争性排斥,但不一定是免疫调节,那么这是合适的。因此,培养物选择通常是一个临时过程。益生菌剂量益生菌的剂量通常为至细胞g1饲料(最好为个细胞g1以保证罗汉鱼对嗜水气单胞菌挑战的存活率;),持续7至70天。对于幼体动物,可通过载体(如卤虫)施用。在某些情况下,剂量似乎是任意设定的,而在其他示例中,作者比较了不同细胞浓度的影响。

作用方式在陆生动物中,假设益生菌是通过竞争性排斥发挥作用,即活的生物体(=益生菌)进入消化道,通过产生抑制性分子和/或直接竞争空间、营养物质或氧气来干扰潜在病原体的作用(表3)。对于水生动物,有一些证据表明这一过程,即益生菌可能占据并定植于消化道中的部位,特别是胃肠道粘膜上皮,包括对肠道粘液的附着和生长,并导致肠道内细菌负荷增加。例如,Standen等人(年)报告了尼罗罗非鱼(Oreochromisniloticus)肠道中酸性小球菌的生长,在喂养益生菌6周后,该生物体占可培养细菌微生物区系的约3%。此外,在口服益生菌后,中肠和后肠的结构也得到了改善(Sharifuzzaman等人,年)。尽管如此,肯定有证据表明,一旦停止喂食益生菌,其在消化道中的数量就会下降。这表明益生菌的活细胞在消化道中的短暂存在。然而,由于摄入益生菌,肠道微生物群很可能会受到节制。然而,有证据表明,使用益生菌导致病原体,例如哈维氏弧菌,附着在肠道粘液上的能力同时降低。简而言之,益生菌拮抗了一些病原体。

众多的文献讨论了益生菌抑制病原体的能力。例子包括如下。淀粉样芽孢杆菌--对嗜水菌、爱德华氏菌、哈维菌和副溶血性毒菌产生可扩散的抑制剂。凝结芽孢杆菌-抑制V.vulnificus和其他革兰氏阳性和革兰氏阴性细菌。Brevibacillusbrevis-抑制弧菌。胆汁酸肠球菌--对血管瘤菌有强烈的抑制作用。乳酸乳球菌--对猪链球菌和副猪链球菌有强烈的抑制作用,对加维乳球菌的抑制作用较弱。戊酸小球菌对血管瘤菌有抑制作用。假单胞菌M和M-拮抗黄曲霉菌;以及Vag.fluvialis-抑制V.anguillarum。这种作用方式可能反映了益生菌改善饲料消化率的能力,通过产生必需的营养物质,例如脂肪酸、生物素和维生素B12,以及通过产生包括海藻酸裂解酶、几丁质酶和蛋白酶(表3)。然而,在另一项研究中,结论是虹鳟鱼的消化酶谱没有随着益生菌的施用而发生明显的改变。已有报道说,bacteriovorusbdellovibrios的捕食。此外,无疑还有细菌素生产者的作用。例如,A.mediaA通过生产类似细菌素的抑制物质,控制太平洋牡蛎幼虫的V.tubiashii感染。

已有报告称,生理条件得到了改善,例如Marron(Cheraxtenuimanus)的尾部肌肉指数明显增加。如果在鱼类发育的早期阶段使用,例如幼体,益生菌可能有助于改善变态和减少断奶引起的压力,如塞内加尔鳎鱼(Soleasenegalensis)中ShewanellaputrefaciensPdp11的报道。有一些证据表明,服用一些益生菌,例如A.sobria和Brochothrixthermosphacta,可能导致表皮增厚,因此有助于提高对皮肤感染的抵抗力。许多益生菌已被认为在鳍鱼和贝类,例如虾具有免疫调节剂功能。在有鳍鱼类中,通常会刺激先天和细胞免疫,包括增加以下内容。细胞因子的表达/上调,血细胞比率。吞噬细胞和溶菌酶活性。呼吸爆发。超氧化物歧化酶。抗蛋白酶。髓过氧化物酶。过氧化物酶。血细胞的数量。白细胞。淋巴细胞。单核细胞。红细胞。腺泡细胞。中性粒细胞的粘附。中性粒细胞的迁移。血浆杀菌活性。补体活性。细胞毒性。总蛋白。[免疫]球蛋白[=体液免疫]。白蛋白。血清细菌凝集滴度。

有趣的是,当植物乳杆菌VSG3被喂养给罗汉鱼(Labeorohita)时,喂养30天后IgM增加,但60天后没有增加。在肠道中,益生菌可能通过肠道相关的淋巴组织刺激免疫系统。对于贝类,特别是虾,已经描述了肝脏指数的变化和酚氧化酶和超氧化物歧化酶的活性。在一项涉及日本河豚(Takifugurubripes)头肾细胞的体外研究中,细胞因子基因反应显著增强,这些细胞暴露在来自蒙古乳制品的热杀乳酸菌中。因此,乳酸菌引发了抗病毒(I-IFN-1和IFN-γ)、细胞介导的免疫调节剂(IL-12p35、IL-12p40和IL-18)、促炎症(IL-1βα、IL-6、IL-17A/F-3、TNF-α和TNF-N)和调节(IL-2、IL-7、IL-15、IL-21、IL-10和TGF-β1)细胞因子的反应。有趣的是,数据指出副乳酸菌亚种比植物乳酸菌具有更大的免疫调节潜力。使用实时PCR,确定IL-1β、IL-10和TNF-α基因表达在喂养植物乳杆菌后在头肾中明显上调。在一项单独的研究中,尼罗罗非鱼用Pe.acidilactici喂养后,促炎症细胞因子TNF-α被上调。此外,在橄榄比目鱼(Paralichthysolivaceus)中喂食乳酸菌后,IL-12和IFN-γ被诱导。另外,Reyes-Becerril等人(年)指出,用微藻Navicula与Lb.sakei联合喂养4周后,金头鲷(Sparusaurata)的头肾中IL-1β、IL-8和β-防御素基因上调。当单独使用冻干的微藻时,2周时对环氧化酶2和转铁蛋白基因有明显的影响,4周时对IL-1β、IL-8、闭锁和转铁蛋白有明显的影响。饲喂Bac.coagulans导致一些明显的反应差异,石斑鱼(Epinepheluscoioides)的骨髓分化因子(MyD88)、IL-1β、TNF-2表达增加,斑马鱼(Daniorerio)的Toll样受体(TLR-4、TNF-γ、TRAM1)和核因子(NF)-kappaB表达增加。

各种益生菌产生的免疫反应类型似乎存在差异。例如,A.sobriaGC2促进了更高的吞噬活动,而Br.thermosphacteraBA导致了呼吸爆发活动的增强。然而,工作者倾向于研究多样化的参数,其中许多参数在不同的调查中并不常见。因此,很难对反应进行详细的比较。由于许多研究没有报告这方面的情况,喂养期间制剂的生存能力可能受到质疑。然而,至少有一项调查表明,灭活的细胞培养物与存活的对应物一样好用。事实上,热灭活并没有降低免疫调节能力,即大西洋鳕鱼(Gadusmorhua)衍生的肠上皮细胞的血球素、g型溶菌酶、金属硫蛋白和转铁蛋白的表达,尽管活的益生菌细胞诱发了更高的免疫反应。一些工作者已经确定了负责免疫调节的关键分子。因此,来自革兰氏阴性细菌的脂多糖(LPS)对鱼类有免疫刺激作用,导致吞噬作用增加,抗体产生,化学发光反应和超氧阴离子产生增强。给予LPS、外膜蛋白(OMPs)、全细胞蛋白(WCPs)和GC2和JB-1的活细胞,然后在第8天挑战Yersiniaruckeri生物型2,导致80-%的生存率,而对照组只有10%的生存率。这与Arijo等人(年)的观点基本一致,他们报告了虹鳟鱼(Oncorhynchusmykiss)对益生菌的OMPs和细胞外产品(ECPs)的抗体反应。因此,大量的微生物已被考虑用作水产养殖中的益生菌,其作用方式越来越多地表明是免疫调节,其中一些亚细胞成分本身就作为免疫刺激物发挥作用。如果益生菌能诱发免疫反应,那么与免疫刺激剂或疫苗有什么区别?免疫刺激剂许多成分被描述为免疫刺激剂,包括β-1,3葡聚糖和LPS,通过注射或口服给药。此外,据报道,广泛的植物产品在喂养鱼类时具有免疫刺激活性。迄今为止,人们对β-1,3葡聚糖在增重和改善健康方面的作用最感兴趣,包括对感染性疾病的保护。β-1,3葡聚糖的使用被认为可以提高对特定疾病的抵抗力,包括气单胞菌病、肠道红嘴病、希特拉病、巴氏杆菌病和弧菌病,其作用方式反映了对先天和细胞免疫参数的刺激,特别是白细胞数量的增加,中性粒细胞和单核细胞比例的提高,以及肾脏巨噬细胞超氧阴离子产量的提高和肠道内炎症细胞浸润的增加。使用葡聚糖,如五味子和硬聚糖,导致黄鱼(Seriolaquinqueradiata)的血清补体和溶菌酶水平的增加,以及代偿细胞更大的吞噬活性。此外,Chang等人(年)给橙斑石斑鱼(Epinephuscoioides)喂食1.0和2.0克蘑菇β-葡聚糖kg-1的饲料,记录了替代补体、溶菌酶、吞噬细胞和呼吸爆发活动的增加,以及对溶藻菌挑战的保护。在用含有mgkg-1α-生育酚和mgkg-1抗坏血酸的食物喂养5周后,每3个月给海鲈鱼(Dicentrarchuslabrax)提供2%的β-1,3和β-1,6葡聚糖和mgkg-1α-生育酚和抗坏血酸,每天按体重的2%计算,为期40周。结果是补体激活的替代途径和溶菌酶活性明显增加,后者在鱼之间有明显的个体差异。然而,在蛋白质含量或白蛋白-球蛋白比率方面没有记录到明显的差异。以1.0-2.0%的比例喂养镜鲤8周,与改善生长、提高血细胞比容(仅在2.0%的饮食补充下)和白细胞更多地渗透到前肠上皮层而不是后肠上皮层有关(Kuhlwein等人,)。对鲤鱼(Cyprinuscarpio)口服LPS,剂量为5、10和20μgkg-1day-1,持续30和60天,并确定增强头肾巨噬细胞的吞噬和杀细菌活性以及血清溶菌酶活性。有增强IL-1β和TNF-αmRNA的表达,但减少IL-6在头肾的表达。NyaAustin()在虹鳟鱼幼鱼挑战水蚤前14天,喂食1-15毫克LPSg-1的饲料,当时死亡率大幅下降。这些鱼显示出更高的抗蛋白酶、杀细菌、溶菌酶、氧化爆裂和吞噬活性,以及总蛋白。同样地,口服来自Pantoeaagglomerans的LPS[10和20微克公斤体重-1天-1,93天]给虹鳟鱼,导致免疫功能的改善和更好的生长。数据显示,用较高剂量的LPS喂养的鱼,肠道小球细胞的密度增加,溶菌酶、杀细菌和呼吸爆发活动增强,血清补体水平提高。一种蛋白质结合的多糖,从蘑菇,Coriolusversicolor中分离出来,增强了罗非鱼对Edw.tarda的抵抗力。因此,在0.1毫克公斤-1体重的剂量下,3天后记录了抵抗力[并持续21天],并在腹腔注射应用后1周达到最大限度。在挑战前的21天,以0.1mgg-1体重口服也有利于减少死亡率。在鱼类中,通过注射多糖,增加了前肾细胞对羊红细胞的吞噬活性,并迅速消除了血液中的病原体。一种商业类胡萝卜素,番茄红素[含有神经孢子素、xi-胡萝卜素、spheroidenone和methoxyneurosporene],当以1%的剂量喂养7周时,导致海水红罗非鱼(O.mossambicus×O.niloticus)的生长改善[=体重增加]。此外,替代补体和溶菌酶的活动也有显著增加。

植物产品广泛的植物产品被认为具有健康益处,包括对细菌疾病的保护和对鱼类口服的免疫调节。例子包括以下。猫毛叶,Euphorbiahirta以50gkg-1的剂量喂食鲤鱼的猫毛叶水提物,导致吞噬率提高,并保护鲤鱼免受荧光菌的挑战(PratheepaSukumaran)。大蒜,Alliumsativum将新鲜的大蒜捣碎,以0.5-1.0克克-1的饲料,喂给虹鳟鱼14天,控制了水蚤的感染(4%的死亡率,而对照组的死亡率是88%)。此外,魚類生長得更好,並顯示出更多的免疫標記,包括紅血球和白血球的數量、抗蛋白酶、殺菌劑、血色素、溶菌酶、吞噬活動和呼吸爆發活動的增加。生姜,Zingiberoffinale以0.5-1.0克克-1的饲料,喂养虹鳟鱼14天,控制了嗜水菌的感染(0%的死亡率,而对照组的死亡率为64%)。同样地,生长和免疫功能也有改善,包括淋巴细胞、巨噬细胞和中性粒细胞的数量,以及增强抗蛋白酶、杀细菌、溶菌酶、吞噬细胞和呼吸爆发的活动。圣罗勒,Ocimumsanctum芳香植物圣罗勒(Ocimumsanctum)的叶子萃取物被腹腔注射和在单独的实验中口服,结果显示罗非鱼的免疫刺激,并保护它们免受嗜水菌的挑战。一个抗体反应被记录下来,以及由硝化蓝四唑试验确定的中性粒细胞活动。丛林天竺葵,Ixoracoccinea丛林天竺葵的粗提物和纯提物,在金鱼(Carassiusauratus)挑战水蚤之前,以mgkg-1喂养30天,这导致对照组和粗提物和纯提物喂养的鱼,分别有%、40%和20%的死亡(Anusha等人,)。这些鱼显示出更高的杀菌和吞噬活动水平,以及球蛋白、血红蛋白、溶菌酶、血清白蛋白和蛋白质。谷神,槐树叶子在罗非鱼挑战St.agalactiae之前,以0.1%(w/v)的比例喂食中药材谷神,导致73.3%的相对存活率(RPS)。刺激抗蛋白酶、补体、溶菌酶、骨髓过氧化物酶、活性氧和活性氮的活性。葛藤,葛藤属植物葛藤以1.0-2.0%的浓度喂食海带石斑鱼(Epinephelusbruneus)4周,导致更好的生长,增加对哈维菌挑战的保护,提高红血球、白血球、淋巴细胞和单核细胞计数、白蛋白和总蛋白,并增加抗蛋白酶、杀菌剂、血红蛋白、溶菌酶、超氧阴离子的产生。枇杷,Eriobotryajaponica枇杷提取物以1.0%和2.0%的比例添加到饲料中,在挑战哈维菌(=V.carchariae)之前,给海带石斑鱼(Epinephelusbruneus)服用1-4周(Kimetal.)。结果显示死亡率降低,白细胞计数、白蛋白、补体、球蛋白、溶菌酶、血清总蛋白、血清凝集抗体滴度、超氧阴离子、淋巴因子生产指数、吞噬作用和杀菌活性增加。羽扇豆,羽扇豆(Lupinusperennis虹鳟鱼在挑战水蚤之前,用1%羽扇豆喂养14天。数据显示,与对照组32%的死亡率相比,死亡率降低到0%,红血球和白血球的数量、抗蛋白酶、总蛋白、血清杀菌活性、呼吸爆发、骨髓过氧化物酶、补体和溶菌酶活性增加。芒果,Mangiferaindica虹鳟鱼在受到嗜水菌挑战之前,用1%的芒果喂养14天。数据显示,与对照组32%的死亡率相比,死亡率降低到4%,红血球和白血球的数量、抗蛋白酶、总蛋白、血清杀菌活性、呼吸爆发、骨髓过氧化物酶、补体和溶菌酶活性都有增加。印度楝树,Azadirachtaindica以0.5%(w/v)的比例喂食楝树干叶,导致鲤鱼幼苗的死亡率降低(当受到嗜水菌的挑战时,死亡率为35%,而对照组为85%)。接受楝树的鱼,显示更多的白蛋白、溶菌酶、血清蛋白和超氧阴离子水平。夜来香,Nyctanthesarbortristis从印度药用植物夜来香的种子中提取的氯仿,以0.1-1.0%的浓度喂养罗非鱼长达3周,并挑战嗜水菌。疾病的发生减少了,并且刺激了免疫参数,即替代补体、溶菌酶、活性氧、活性氮中间物和骨髓过氧化物酶的活性。薄荷,薄荷(Menthapiperita)将薄荷(Menthapiperita)以1-5gkg-1的饲料喂养亚洲海鲈(Lutescalarifer)4周,导致在挑战V.harveyi后死亡率降低,改善生长和免疫刺激。因此,鱼显示红血球和白血球的数量增加,更多的血细胞比容、血红蛋白血清蛋白和球蛋白水平,以及加强抗蛋白酶、杀菌、溶菌酶、吞噬细胞和呼吸爆发的活动。大黄,大黄草大黄的蒽醌提取物以0.1%的比例喂养武昌鱼(Megalobramaamblycephala)10周,并挑战嗜水菌。数据显示,死亡率从对照组的%下降到实验组的86.67%,并刺激了血清总蛋白、碱性磷酸酶、肝脏过氧化氢酶、溶菌酶和超氧化物歧化酶,以及热休克蛋白70(HSP70)mRNA的相对表达。此外,丙氨酸氨基转移酶、天门冬氨酸氨基转移酶、丙二醛和血清皮质醇都有减少。粉红芒果,Cratoxylumformosum在罗非鱼受到St.agalactiae的挑战之前,将粉红膜的水提取物(1.0-1.5%)喂给罗非鱼30天。接受1.0%和1.5%粉红膜提取物的鱼的死亡率从对照组的85%分别减少到12%和10%。免疫参数得到加强,包括溶菌酶、吞噬细胞和呼吸爆发的活动。荨麻,荨麻(Urticadioica)在挑战Aer.hydrophila之前,用1%刺荨麻喂养虹鳟鱼14天。数据显示,与对照组32%的死亡率相比,死亡率降低到4%,血细胞比容、血红蛋白、抗蛋白酶、总蛋白、血清杀菌活性、呼吸爆发、骨髓过氧化物酶、补体和溶菌酶活性增加。姜黄,Curcumalonga姜黄按体重的4%,以1.0和5.0gkg-1的饲料喂养幼年罗汉鱼,在挑战水蚤之前的60天。数据显示,对挑战的保护和刺激免疫参数(溶菌酶和血清杀菌活性,以及超氧阴离子的产生)。在单独的实验中,牛奶草(Astragalusmembranaceous)、黄芩(Baikalskullcap)和连翘(LianQiaoFructusforsythiae)被添加到2%的饲料中,喂养红鼓(Sciaenopsocellatus)28天,导致挑战V.splendidus(RPS=80%)后的死亡率下降,并刺激免疫特性,即溶菌酶活性和吞噬指数。植物的组合一个专有的草药混合物,ImmuPlus,包含圣罗勒、印度人参(Withaniasomnifera)、古藤(Tinosporacordifolia)和印度醋栗(Emblicaoffinalis),以1.0克/公斤的饲料喂养罗汉鱼苗30天,然后用嗜水菌挑战。结果显示,与对照组相比,罗汉鱼有更好的生长,对挑战的保护和免疫参数的刺激,包括溶菌酶活性和血清溶血素和细菌凝集的滴度。两种中草药(0.1%的量),黄芪和日本金银花(Lonicerajaponica)(单独或混合喂养),加上或不加0.05%的硼,在尼罗罗非鱼挑战嗜水菌之前,喂养4周(Ardo等人,)。结果显示,当这些草药与硼结合使用时,死亡率明显降低,存活率增加,并刺激溶菌酶、吞噬细胞和呼吸爆发活动,但对血浆总蛋白或总免疫球蛋白水平没有影响。印度榕树(Ficusbenghalensis)和白铅树(Leucaenaleucocephala)的粉末制剂(5%),在非洲鲨齿鲶(Clariasgariepinus)挑战嗜水菌之前,被喂养20天。血清抗体滴度、溶菌酶活性和吞噬指数都有增加。益生菌与免疫刺激剂的结合鼠李糖乳杆菌(LactobacillusrhamnosusGG)已经与葡聚糖结合使用,并在尼罗罗非鱼中喂养2周,以应对气单胞菌的挑战。与对照组相比,鱼的死亡率较低,肠道中的炎症细胞浸润增加;这在单独使用葡聚糖而不是葡聚糖与乳酸菌喂养的组中较高。注意到免疫刺激作用的确切性质不同。将酸性小球菌与短链果寡糖一起喂给大西洋鲑鱼(Salmosalar)63天,导致溶菌酶活性增强,肠道中上皮白细胞的浸润增加。通过实时PCR,在前肠和后肠有IL1β、TNFαa、IL8、TLR3和MX-1免疫相关基因的上调。Lc.lactissubsp.lactis和Bac.circulans被单独或与2%(w/v)的益生元阿拉伯木聚糖一起喂给西伯利亚鲟。结果是,当乳酸菌亚种与阿拉伯木聚糖一起喂养时,对生长有利。此外,还刺激了先天免疫,即吞噬、呼吸爆发和替代补体活动,以及体液免疫反应。后肠微生物群的16SrDNA分析显示,阿拉伯木聚糖增强了Lc.lactis亚种的定植和生长(但不是Bac.circulans),但减少了细菌的生物多样性。

膳食中补充用枯草芽孢杆菌发酵的柑橘类副产品,评估了橄榄比目鱼的生长、免疫调节和保护其免受爱德华氏菌的挑战。尽管在6周或10周后生长没有改善,但与对照组相比,使用柑橘类副产品,特别是使用枯草芽孢杆菌的细胞,对挑战后的生存有好处。益生菌乳酸菌和由楝树(Azadirachtaindica)、圣罗勒和姜黄(Curcumalonga)组成的乙醇和甲醇三草药混合物在挑战嗜水菌之前被喂给鲤鱼。死亡率降低(50%的死亡率,而接受基本食物的组别为85%),免疫参数增加,包括白血球的数量和呼吸爆发活动增强。将Shewanellaputrefaciens(细胞g-1)与0.1%的β-1,3/1,6-葡聚糖一起喂给海鲷(Sparusaurata),2周后刺激生长并增强抗蛋白酶吞噬活性。口服疫苗口服疫苗可用于初级或加强疫苗接种。然而,并不总是涉及作用模式,读者不可能总是知道疫苗在宿主体内的实际作用。当考虑到宿主反应时,抗体滴度在活动列表中占据重要地位。当然,已经尝试了许多创新方法,包括涉及海藻酸微粒的微胶囊化、壳聚糖纳米颗粒,含有溶菌酶的壳聚糖-海藻酸微球和通过西咪替丁保护抗原。海藻酸微粒和鳗鲡弧菌疫苗的上清液部分被开发用于在通过鲤鱼或虹鳟消化道前部期间保护抗原。结果是全身和粘膜抗体的发展。对包裹灭活全细胞疫苗的海藻酸微粒进行了评估,以控制导致鳟鱼RPS为50%的乳球菌病[RPS=87%,当用作腹腔注射疫苗后3个月的促进剂时]。同样,海藻酸盐与Edw.tardaATCC的天然无毒培养物一起使用。保护日本比目鱼免受挑战。记录血清抗体和血清杀菌活性。Vervarcke等人(4年)报道了体液表面抗体,他们在包衣丸中使用鳗鲡血清组O2,将其用于非洲鲶鱼(Clariasgariepinus)。通过鳗鲡弧菌的热灭活细胞和微囊化,在小鼠而非鱼类模型中产生了显著的体液免疫反应。壳聚糖纳米粒子用于口服基于鳗鲡孔蛋白基因的DNA疫苗,导致攻击后鲈鱼(Latescalcifer)的RPS为46%。不幸的是,没有讨论可能的行动模式。此外,壳聚糖微粒和使用副溶血性弧菌OMPK基因的DNA疫苗通过伴随的抗体反应保护了黑鲷。使用Edw的活营养缺陷型突变体。用组胺西咪替丁保护的tarda能够保护橄榄比目鱼免受攻击。但是,封装并不总是有效的,就像Edw的情况一样。

体液抗体作为细菌鱼疫苗的主要作用方式的总体作用尚不清楚。当然,有大量证据表明,鱼类在接种疫苗后会产生抗体,以对抗各种细菌病原体,例如沙门氏alivibriosalmonicida(LPS抗体;),Edw.tarda、F.columnare、V.anguillarum和V.harveyi,尽管与保护的相关性尚未牢固确立。例如,Leal等人(年)的方法导致抗体滴度高,但当尼罗河罗非鱼鱼种受到F.columnare攻击时,缺乏保护。相比之下,疫苗接种导致的抗体滴度较低或不存在,例如,柱状芽孢杆菌产品。除了抗体滴度的发展,口服Edw疫苗与增强的吞噬活性有关。讨论控制鱼病的方法多种多样,益生菌、免疫刺激剂、植物产品和口服疫苗都是以免疫调节为中心或至少包括免疫调节的活动方式。很明显,一些益生菌对多种病原体产生了有益的影响,例如BacillusJB-1和A.sobriaGC2控制了A.salmonicida、Lc.garvieae、St.iniae、V.anguillarum、V.ordalii和Y.ruckeri的感染。然而,并不总是需要有活力的细胞,益生菌的亚细胞成分,即细胞壁蛋白(CWPs)、OMPs、LPS和WCPs,可能在宿主中产生有益的效果,即作为免疫刺激剂。益生菌是否应被视为异源口服疫苗?人们接受疫苗刺激体液免疫,但益生菌不一定这样做,而是针对先天和细胞免疫参数。然而,与益生菌不同,对口服疫苗的研究往往不


本文编辑:佚名
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